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細(xì)胞名稱F9（小鼠畸胎瘤細(xì)胞/小鼠胚胎癌細(xì)胞）
種屬小鼠
年齡（性別）胚胎
組織來源睪丸；畸胎癌；睪丸畸胎癌
生長特性貼壁
細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣
背景描述F9細(xì)胞在維甲酸和聯(lián)丁酰環(huán)磷腺苷(cAMP)刺激下，可分化成體壁內(nèi)胚層。分化的細(xì)胞合成血漿酶原活化因子、層粘連蛋白和Ⅳ型膠原質(zhì)。只有在經(jīng)過維甲酸處理后，F(xiàn)9細(xì)胞上的cAMP才有作用。F9細(xì)胞中有3個拷貝β1整合素基因；檢測表明，F(xiàn)9細(xì)胞鼠痘病毒陰性。
生長培養(yǎng)基DMEM高糖＋10% FBS＋1% P/S
F9（小鼠畸胎瘤細(xì)胞/小鼠胚胎癌細(xì)胞）操作說明：
1)對于常溫運輸?shù)募?xì)胞，收到細(xì)胞后，檢查是否有運輸問題，即細(xì)胞培養(yǎng)瓶或管是否破損，細(xì)胞培養(yǎng)液是否溢出。若沒有運輸問題，請75%酒精消毒后，保留封口膜，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置。嚴(yán)格檢查培養(yǎng)箱的參數(shù)：溫度，濕度和CO2濃度。細(xì)胞靜置時間一般為6-12小時后，細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后，即可開始后續(xù)操作。選用正確的細(xì)胞培養(yǎng)體系，A2780(人卵巢癌細(xì)胞)嚴(yán)格按照說明書的培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)。條件允許，培養(yǎng)的前三天內(nèi)做細(xì)胞拍照記錄，通過郵件發(fā)送給我們做及時狀態(tài)跟蹤。
2)對于干冰運輸?shù)募?xì)胞，請取出冷凍管后，須立即放入37C水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化，并注意水面不可超過冷凍管蓋沿，否則易發(fā)生污染情形。然后將其復(fù)蘇培養(yǎng)，次日更換培養(yǎng)液。
F9（小鼠畸胎瘤細(xì)胞/小鼠胚胎癌細(xì)胞）注意事項：
1)細(xì)胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察，如細(xì)胞大部分又貼回瓶底，表明細(xì)胞活力正常，剩余漂浮的細(xì)胞可以離心去掉，留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細(xì)胞生長至匯合度80%，進(jìn)行消化傳代；如細(xì)胞還是不貼壁，將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo)，直到問題解決。
2)對于生長緩慢的貼壁細(xì)胞：可采用適當(dāng)?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度，或隔日換液的方法來保證細(xì)胞的狀態(tài)和生長速度。
3)對于生長不均的貼壁細(xì)胞：在培養(yǎng)過程中若出現(xiàn)細(xì)胞分布明顯不均時（即某一區(qū)域細(xì)胞已重疊生長，而旁邊則為一塊空白），此時可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重新打散，貼壁，加入新培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
F9（小鼠畸胎瘤細(xì)胞/小鼠胚胎癌細(xì)胞）下面介紹幾種細(xì)胞培養(yǎng)過程中常見的污染：
一)桿菌污染：培養(yǎng)基中加入抗生素可以減少此種污染，但也不是絕對的。
二)支原體污染：傳說中的黑焦蟲，長得暴快。24小時就滿視野都是了。污染源大多數(shù)情況下是培養(yǎng)用血清。
三)念珠菌污染：似乎無處不在，而且頑固得很。長得暴快(12h就能在細(xì)胞上面密布)。培養(yǎng)液澄清。低倍顯微鏡下像黑色的沙子鋪在細(xì)胞上，高倍鏡下呈樹枝狀或葡萄狀。
四)霉菌污染、比較常見的一種污染，常常來源于污染的空氣、水和器械。
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