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細(xì)胞介紹

HS 683細(xì)胞源自76歲白人男性的左顳葉側(cè)膠質(zhì)瘤組織。HS 683細(xì)胞有微絨毛，無(wú)橋粒。HS 683細(xì)胞可以用于3D細(xì)胞培養(yǎng)、癌癥研究、神經(jīng)科學(xué)研究。

基本信息

細(xì)胞別稱：Hs 683;HS-683;Hs-683;Hs683;

HS683;Hs 683.T;HS 683T;Hs683T

細(xì)胞來(lái)源：腦;左顳葉

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

安全等級(jí)：BSL1

包裝規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

推薦換液：2~3次/周

傳代比例：1:2-1:4

倍增時(shí)間：~49-96 hours

保藏機(jī)構(gòu)：ATCC;HTB-138

培養(yǎng)保存

培養(yǎng)體系：DMEM(TM055)+10%FBS(TS500)

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%;CO2.5%;溫度：37℃

凍存條件：基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+40%FBS(TS500)，液氮保存

傳代步驟

如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次;

加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化;

按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻;

收到細(xì)胞后首次傳代推薦將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，建議凍存一支備用，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2到1:4的比例進(jìn)行。

凍存步驟

細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù);

4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為5%，細(xì)胞密度不低于1x10(6)/ml，每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí);

將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞用途

僅供科研使用。

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