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細胞名稱H-4-II-E [H4-II-E](大鼠肝細胞瘤)

種屬大鼠

年齡(性別)

組織來源

生長特性貼壁

細胞形態(tài)上皮細胞樣

背景描述H-4-II-E [H4-II-E]細胞可誘導產(chǎn)生芳香烴羥化酶，用于檢測環(huán)境樣品或食物提取物種皮克級的多氯聯(lián)苯有機化合物。

生長培養(yǎng)基MEM)+10% FBS+1% P/S

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%;CO2.5%溫度：37℃

大鼠肝細胞瘤當重要的培養(yǎng)污染時，研究者可能試圖消除或控制污染。首先，確定污染物是細菌、真菌、支原體或酵母，把污染細胞與其它細胞系隔離開，用實驗室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺，檢查HEPA過濾器。

高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對一些細胞系有毒性，因而，做劑量反應實驗確定抗生素和抗霉菌素產(chǎn)生毒性的劑量水平。這點在使用抗生素如*和抗霉菌素如泰樂菌素時尤其重要。下面是*的確定毒性水平和消除培養(yǎng)污染的實驗步驟。

1 在無抗生素的培養(yǎng)基中消化、計數(shù)和稀釋細胞，稀釋到常規(guī)細胞傳代的濃度。

2 分散細胞懸液到多孔培養(yǎng)板中，或幾個小培養(yǎng)瓶中。在一個濃度梯度范圍內(nèi)，把選擇抗生素加入到每一個孔中。例如，**下列濃度，0.25.0.50.1.0.2.0.4.0.8.0 mg/ml。

3 每天觀測細胞毒性指標，如脫落，出現(xiàn)空泡，匯合度下降和變圓。

4 確定抗生素毒性水平后，使用低于毒性濃度2-3倍濃度的抗生素的培養(yǎng)液培養(yǎng)細胞2-3代。

5 在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)細胞一代。

6 重復步驟4.

7 在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)4-6代，確定污染是否以已被消除。

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