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非洲綠猴腎細胞Vero細胞庫細胞培養(yǎng)

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所在地區(qū):湖北 時間:2024-01-27【加入收藏夾】【關(guān)閉

貨源介紹

  Vero非洲綠猴腎細胞是由日本千葉大學(xué)的Y·Yasumura和Y·Kawakita從正常成年非洲綠猴的腎臟建株的。1964年6月15日,B·Simizu將Vero細胞從千葉大學(xué)帶到國立健康研究所(NIH)國立過敏及傳染病研究所熱帶病毒實驗室時,已傳至第93代。

  種屬非洲:綠猴

  年齡(性別)

  組織來源正常腎

  生長特性:貼壁

  細胞形態(tài):上皮細胞樣

  生長培養(yǎng)基MEM+10%FBS+1%P/S

  培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%溫度:37℃

  智立中特(武漢)生物科技有限公司主要致力于質(zhì)粒微生物資源的保護、共享和持續(xù)利用,圍繞我國生命科學(xué)研究、生物技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)業(yè)發(fā)展等重大需求,探索、發(fā)現(xiàn)、收集國內(nèi)外的微生物資源,妥善長期保存管理;在保證生物安全和保護知識產(chǎn)權(quán)的前提下,為工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、衛(wèi)生健康、環(huán)境保護、科研教育提供質(zhì)粒載體物物種資源、基因資源、信息資源和專業(yè)技術(shù)服務(wù)。旗下質(zhì)粒載體網(wǎng)是一款提供質(zhì)粒載體展示及定制的專業(yè)型網(wǎng)站,由智立中特(武漢)生物科技有限公司聯(lián)合多家企業(yè)公司科研院校共同打造!主要展示了各種基因類型下的質(zhì)粒載體!

  我們的工作主要包括:廣泛分離、收集、保藏、交換和供應(yīng)各類微生物質(zhì)粒菌種;保存用于專利程序的各種可培養(yǎng)生物材料;質(zhì)粒載體類保藏技術(shù)研究;微生物分離、培養(yǎng)技術(shù)研究;微生物鑒定和復(fù)核技術(shù)研究;保藏菌種的資料情報收集和提供及編輯微生物菌種目錄。

  細胞處理:

  1)凍存細胞的復(fù)蘇:

  將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

  2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

  對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:

  1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

  2.加入0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當(dāng)延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

  3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。

  3)細胞凍存:收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。Vero非洲綠猴腎細胞是由日本千葉大學(xué)的Y·Yasumura和Y·Kawakita從正常成年非洲綠猴的腎臟建株的。1964年6月15日,B·Simizu將Vero細胞從千葉大學(xué)帶到國立健康研究所(NIH)國立過敏及傳染病研究所熱帶病毒實驗室時,已傳至第93代。

  種屬非洲:綠猴

  年齡(性別)

  組織來源正常腎

  生長特性:貼壁

  細胞形態(tài):上皮細胞樣

  生長培養(yǎng)基MEM+10%FBS+1%P/S

  培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%溫度:37℃

  智立中特(武漢)生物科技有限公司主要致力于質(zhì)粒微生物資源的保護、共享和持續(xù)利用,圍繞我國生命科學(xué)研究、生物技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)業(yè)發(fā)展等重大需求,探索、發(fā)現(xiàn)、收集國內(nèi)外的微生物資源,妥善長期保存管理;在保證生物安全和保護知識產(chǎn)權(quán)的前提下,為工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、衛(wèi)生健康、環(huán)境保護、科研教育提供質(zhì)粒載體物物種資源、基因資源、信息資源和專業(yè)技術(shù)服務(wù)。旗下質(zhì)粒載體網(wǎng)是一款提供質(zhì)粒載體展示及定制的專業(yè)型網(wǎng)站,由智立中特(武漢)生物科技有限公司聯(lián)合多家企業(yè)公司科研院校共同打造!主要展示了各種基因類型下的質(zhì)粒載體!

  我們的工作主要包括:廣泛分離、收集、保藏、交換和供應(yīng)各類微生物質(zhì)粒菌種;保存用于專利程序的各種可培養(yǎng)生物材料;質(zhì)粒載體類保藏技術(shù)研究;微生物分離、培養(yǎng)技術(shù)研究;微生物鑒定和復(fù)核技術(shù)研究;保藏菌種的資料情報收集和提供及編輯微生物菌種目錄。

  細胞處理:

  1)凍存細胞的復(fù)蘇:

  將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

  2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

  對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:

  1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

  2.加入0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當(dāng)延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

  3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。

  3)細胞凍存:收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

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