貨源介紹
智立中特(武漢)生物科技有限公司主要致力于質(zhì)粒微生物資源的保護(hù)、共享和持續(xù)利用,圍繞我國生命科學(xué)研究、生物技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)業(yè)發(fā)展等重大需求,探索、發(fā)現(xiàn)、收集國內(nèi)外的微生物資源,妥善長期保存管理;在保證生物安全和保護(hù)知識產(chǎn)權(quán)的前提下,為工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、衛(wèi)生健康、環(huán)境保護(hù)、科研教育提供質(zhì)粒載體物物種資源、基因資源、信息資源和專業(yè)技術(shù)服務(wù)。旗下質(zhì)粒載體網(wǎng)是一款提供質(zhì)粒載體展示及定制的專業(yè)型網(wǎng)站,由智立中特(武漢)生物科技有限公司聯(lián)合多家企業(yè)公司科研院校共同打造!主要展示了各種基因類型下的質(zhì)粒載體!
細(xì)胞名稱:Y1(Y-1)(小鼠腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞)
種屬:小鼠
年齡(性別)
組織來源
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
背景描述:Y1(Y-1)細(xì)胞是ECA85051002的后備培養(yǎng)物;Y1(Y-1)是一株能分泌鼠類甾類激素、分泌型腎上腺皮質(zhì)激素的細(xì)胞系。
生長培養(yǎng)基:RPMI-1640+10%FBS+1%P/S
培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%溫度:37℃
運(yùn)輸和保存:干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞:(1)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。
細(xì)胞接收后的處理:
1)收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。2)請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上,可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中,若因運(yùn)輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。4)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;2mM L-谷氨酰胺;NEAA 1%雙抗,1%。
注意事項(xiàng):培養(yǎng)細(xì)胞的過程中細(xì)胞會發(fā)生堆疊和松散貼壁的細(xì)胞團(tuán)這是正常的。需要2-3天對細(xì)胞進(jìn)行一次換液以保證細(xì)胞的正常生長。該細(xì)胞貼壁較慢,復(fù)蘇細(xì)胞后48h內(nèi)盡量不要移動細(xì)胞讓細(xì)胞達(dá)到最佳的貼壁狀態(tài)。生長過程中會懸浮細(xì)胞出現(xiàn),在換液和傳代過程中需要離心回收懸浮的細(xì)胞。丟棄懸浮的細(xì)胞會使細(xì)胞的密度變低,這個(gè)細(xì)胞在培養(yǎng)過程中不會達(dá)到100%的融合。細(xì)胞生長過密會引起貼壁的細(xì)胞變成懸浮的狀態(tài)。明膠或多聚賴氨酸包被的培養(yǎng)瓶可以使細(xì)胞更好的貼壁。
2)培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
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